First Strand cDNA Synthesis Kit
——高效cDNA一鏈合成試劑盒
產(chǎn)品概述
本產(chǎn)品基于PreScript II Reverse Transcriptase，包含合成高質(zhì)量第一鏈cDNA所需的所有成分，適合于后續(xù)的PCR、qPCR以及PCR克隆。5 × RT Reaction Mix包含優(yōu)化的緩沖體系和dNTPs，可根據(jù)需要，選擇Oligo (dT)23VN、Random hexamers或基因特異引物作為逆轉(zhuǎn)錄引物。PreScript Ⅱ Reverse Transcriptase是通過定點(diǎn)突變得到RNase H活性缺失的M-MLV突變體，與常見的通過刪除RNase H結(jié)構(gòu)域方法得到的突變體相比, 本產(chǎn)品保留了完整的蛋白結(jié)構(gòu), 因此具有與野生型相同的聚合酶活性, 可用于較長的cDNA合成以及全長cDNA 文庫的構(gòu)建等。
產(chǎn)品內(nèi)容
組分 | R411A | R411B |
5× RT Reaction Mix | 200 μL | 400 μL |
PreScript Ⅱ Enzyme Mix | 100 μL | 200 μL |
Oligo (dT )23VN(50μM) | 50 μL | 100 μL |
Random hexamers(50ng/μL) | 50 μL | 100 μL |
RNase-free ddH2O | 1 mL | 1 mL |
產(chǎn)品優(yōu)勢
優(yōu)異的逆轉(zhuǎn)錄效率：高效率的PreScript II Reverse Transcriptase，性能增強(qiáng)的同時(shí)具有野生型相同的聚合酶活性，能打開RNA 復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)，更高效的合成cDNA
模板兼容性強(qiáng)：兼容不同物種及完整度較差的Total RNA
應(yīng)用范圍廣：可用于使用Random Primer、Oligo dT Primer以及Specific Primer的各種逆轉(zhuǎn)錄情況
實(shí)驗(yàn)案例
逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可適用于各種PCR酶的擴(kuò)增反應(yīng)
使用PreScript II Reverse Transcriptase以HeLa Total RNA(1μg)為模板，按照說明書反應(yīng)體系和程序進(jìn)行cDNA的合成，然后使用各種PCR酶，以AGT(約1000bp)為目的片段進(jìn)行PCR反應(yīng)。結(jié)果顯示，所有的酶都確認(rèn)有擴(kuò)增，PreScript II Reverse Transcriptase的逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可適用于各種PCR酶的擴(kuò)增反應(yīng)。
應(yīng)用范圍
高質(zhì)量第一鏈cDNA的合成，適用于PCR、qPCR以及PCR克隆；用于較長的cDNA合成以及全長cDNA 文庫的構(gòu)建等。
產(chǎn)品儲(chǔ)存
-20℃保存
