First Strand cDNA Synthesis Kit （+gDNA Clearer）
——高效cDNA一鏈合成試劑盒（去基因組）
產(chǎn)品概述
本產(chǎn)品基于PreScript II Reverse Transcriptase，包含合成高質(zhì)量第一鏈cDNA所需的所有成分，適用于后續(xù)的PCR、 qPCR以及PCR克隆。4× gDNA clearer可徹底去除殘留的基因組DNA污染，保證后續(xù)結(jié)果更加可靠。10× RT Reaction Mix包含優(yōu)化的緩沖體系、dNTPs和gDNA clearer終止成分，保證cDNA的完整性，同時可根據(jù)需要，選擇Oligo (dT)23VN、Random hexamers或基因特異引物作為逆轉(zhuǎn)錄引物。PreScript Ⅱ Reverse Transcriptase是通過定點突變得到RNase H活性缺失的M-MLV突變體。與常見的通過刪除RNase H結(jié)構(gòu)域方法得到的突變體相比, 本產(chǎn)品保留了完整的蛋白結(jié)構(gòu), 因此具有與野生型相同的聚合酶活性, 可用于較長的cDNA合成以及全長cDNA 文庫的構(gòu)建等。
產(chǎn)品內(nèi)容
組分 | R412A | R412B |
4× gDNA clearer | 200μL | 400 μL |
10× RT Reaction Mix | 100 μL | 200 μL |
PreScript Ⅱ Enzyme Mix | 100 μL | 200 μL |
Oligo (dT )23VN(50μM) | 50 μL | 100 μL |
Random hexamers(50ng/μL) | 50 μL | 100 μL |
RNase-free ddH2O | 1 mL | 1 mL |
產(chǎn)品優(yōu)勢
更高的逆轉(zhuǎn)錄效率：高效率的PreScript II Reverse Transcriptase，性能增強的同時具有野生型相同的聚合酶活性，能打開RNA 復(fù)雜二級結(jié)構(gòu)，更高效的合成cDNA
模板兼容性強：兼容不同物種及完整度較差的Total RNA
應(yīng)用范圍廣：可用于使用Random Primer、Oligo dT Primer以及Specific Primer的各種逆轉(zhuǎn)錄情況
強勁的基因組DNA清除能力：4× gDNA clearer徹底去除殘留的基因組DNA污染，確保后續(xù)結(jié)果更加可靠
實驗案例
基因組清除效率的檢測
分別投入500ng、50ng、5ng HeLa細胞gDNA 使用英贊R412產(chǎn)品和A公司同類產(chǎn)品中基因組去除模塊做清除效率檢測，結(jié)果顯示，R412產(chǎn)品中的4 × gDNA wiper 可清除高達500 ng 的基因組殘留，并且清除效率達到99% 以上。
2. 與其他公司同類型產(chǎn)品基因組DNA清除能力的比較
在HeLa 細胞total RNA中添加過量的人基因組DNA，與其他公司同類型試劑盒進行基因組DNA去除能力的比較模擬實驗。結(jié)果顯示，R412去除基因組DNA效果更為明顯。
應(yīng)用范圍
高質(zhì)量第一鏈cDNA的合成，適用于PCR、qPCR以及PCR克隆；用于較長的cDNA合成以及全長cDNA 文庫的構(gòu)建等。
產(chǎn)品儲存
-20℃保存
