PreScript Ⅱ RT ProMix for qPCR

Prescript Ⅱ RT ProMix For qPCR

——預(yù)混液形式的qRT-PCR首選試劑

產(chǎn)品概述

本產(chǎn)品保留了完整的PreScript II Reverse Transcriptase蛋白結(jié)構(gòu), 具有與野生型相同的聚合酶活性, 可用于較長(zhǎng)的cDNA合成以及全長(zhǎng)cDNA文庫的構(gòu)建等。產(chǎn)品包含合成高質(zhì)量cDNA所需的所有成分，適合于兩步法RT-qPCR檢測(cè)。2× RT Reaction Mix包含優(yōu)化的緩沖體系、Oligo (dT)₂₃VN、Random hexamers和dNTPs。此外，產(chǎn)品針對(duì)qPCR進(jìn)行特別優(yōu)化，比例優(yōu)化的Random primers/Oligo (dT)₂₃VN primer mix，可以在45min內(nèi)高效合成qPCR所用的模板cDNA。

產(chǎn)品內(nèi)容

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

更高效的逆轉(zhuǎn)錄效率：PreScript II Reverse Transcriptase保留了完整的蛋白結(jié)構(gòu), 具有與野生型相同的聚合酶活性，提高了逆轉(zhuǎn)錄效率

操作簡(jiǎn)便的預(yù)混型試劑：只要添加模板RNA和水，就可以簡(jiǎn)便高效率地合成cDNA，且重復(fù)性良好

寬廣的模板使用范圍：反應(yīng)體系中Total RNA的使用范圍非常寬廣，便于使用

廣闊的可定量擴(kuò)增區(qū)間：比例優(yōu)化的Random primers/Oligo (dT)₂₃VN primer mix可均一、高效地在RNA全序列范圍內(nèi)進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，因此可得到更廣的可定量擴(kuò)增區(qū)域。

實(shí)驗(yàn)案例

1. 優(yōu)異的cDNA合成效率

在10μL反應(yīng)體系中分別添加HeLa細(xì)胞來源的Total RNA 0.5μg~0.5pg，分別進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。然后，在Realtime PCR反應(yīng)液(使用本公司S018產(chǎn)品)中分別添加上述的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液各1% (V/V)，用Realtime PCR對(duì)ACTB和B2M的cDNA量進(jìn)行定量，然后進(jìn)行cDNA合成量的比較。結(jié)果可見，在探討的范圍內(nèi)，模板RNA的量和cDNA的得率密切相關(guān)，但無論模板RNA量的多寡，仍可維持很高的cDNA合成效率?？梢?/span>在目的片段濃度有差異的樣品之間，逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)效率的變化并不大，因此可將定量結(jié)果的誤差控制在最小范圍內(nèi)。

2.強(qiáng)大的逆轉(zhuǎn)錄能力

以HeLa細(xì)胞Total RNA為模板，選擇高、中、低三種表達(dá)量的基因，在說明書提供的反應(yīng)體系及反應(yīng)條件下進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，然后用Realtime PCR檢測(cè)多對(duì)基因，結(jié)果表明，對(duì)不同表達(dá)量的基因，本產(chǎn)品都具有優(yōu)異的逆轉(zhuǎn)錄能力。

應(yīng)用范圍

合成用于qPCR的cDNA模板，特別是較長(zhǎng)的cDNA合成；全長(zhǎng)cDNA文庫的構(gòu)建。

產(chǎn)品儲(chǔ)存

-20℃保存