In Vitro HiScript T7 RNA Synthesis Kit
——體外RNA的合成
產(chǎn)品概述
EnzyValleyTM In Vitro HiScript T7 RNA Synthesis Kit是經(jīng)分子進(jìn)化的T7 RNA Polymerase和優(yōu)化的反應(yīng)體系組合得到的試劑盒。本試劑盒是以四種rNTP為底物,利用含有T7啟動子的DNA模板,從模板DNA T7啟動子下游開始合成與DNA模板中反義鏈互補(bǔ)的RNA,簡單快速地獲得大量的RNA分子,如mRNA、lncRNA、shRNA。合成的RNA可用于諸如RNA結(jié)構(gòu)與功能研究、RNA酶保護(hù)、探針雜交、RNAi、顯微注射及體外翻譯等多方面的下游應(yīng)用。同時轉(zhuǎn)錄過程中可在底物中加入修飾的核苷酸,制備生物素或染料標(biāo)記的RNA。預(yù)計1 μg的模板投入量可以產(chǎn)生150-200μg的RNA。為方便客戶對轉(zhuǎn)錄合成得到的RNA進(jìn)行純化,此試劑盒還提供了用于純化的配套試劑。
產(chǎn)品內(nèi)容
組分 | T317A | T317B |
T7 Enzyme Mix | 40μL | 200μL |
5 × T7 Reaction Mix | 80μL | 400μL |
DNase Ⅰ(1U/μL) | 20μL | 100μL |
rNTP(25mM) | 120μL | 600μL |
Purification Reagent A | 200μL | 1mL |
Purification Reagent B | 40μL | 200μL |
Control DNA Template | 20μL | 100μL |
產(chǎn)品優(yōu)勢
可以轉(zhuǎn)錄合成大量的RNA分子,如mRNA等
方便對合成的RNA分子純化
產(chǎn)量高達(dá)150-200μg
實驗案例
體外轉(zhuǎn)錄RNA

先將含T7啟動子的質(zhì)粒模板線性化處理,后以線性化完成的質(zhì)粒作為DNA模板進(jìn)行體外轉(zhuǎn)錄,反應(yīng)結(jié)束后將RNA產(chǎn)物純化,并通過電泳檢測,檢測結(jié)果如上圖。
優(yōu)異的轉(zhuǎn)錄效率

帶有T7啟動子的不同目標(biāo)長度的DNA轉(zhuǎn)錄成RNA。目標(biāo)片段長度標(biāo)于電泳圖上方
應(yīng)用范圍
合成單鏈RNA;合成高特異性RNA探針;合成siRNA前體;制作RNA剪接反應(yīng)(RNA Splicing)的前體;以帽類似物(Cap analog)為引物,制作Capped mRNA。
產(chǎn)品儲存
-20℃保存